L-墨蝶呤（L-Sepiapterin）是一种重要的生物活性物质，属于蝶啶类化合物。L-墨蝶呤可用于治疗苯丙酮尿症（PKU）等疾病。相关临床试验表明，口服墨蝶呤药物能显著降低PKU患者血液中苯丙氨酸含量。此外，由于它是四氢墨蝶呤的前体，对于四氢墨蝶呤缺乏症以及其他与四氢墨蝶呤相关的病症，如多巴胺反应性肌张力障碍、Segawa综合征等，也有潜在的治疗作用。
生物活性
L - 墨蝶呤可通过下调p70S6K依赖性VEGFR-2表达抑制卵巢癌细胞增殖和迁移。实验中，L-墨蝶呤（1-50μM；20分钟）显著抑制 VEGF-A诱导的（50ng/ml）p70S6K的磷酸化，通过非独立机制抑制VEGF-A诱导的细胞增殖和迁移[1]。
L-墨蝶呤可改善db/db小鼠肠系膜小动脉内皮功能障碍，诱导血管生成。给雄性C57BL/KsJ糖尿病小鼠（db/db）口服L-墨蝶呤（10mg/kg；每日或8周），可显著改善db/db小鼠肠系膜小动脉（SMA）对Ach的舒张作用[2]。
制备方法
第一步：氩气氛、MS-4A存在下、乙腈中、加入过钉酸四丙基铵和4-甲基吗啉N-氧化物、化合物(D)并在60℃下进行搅拌。1小时后,用CeliteTM545过滤后,加入10%氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取。经硫酸镁干燥后,浓缩,采用硅胶柱色谱法进行分离精制,用甲苯倾析,获得化合物(1)。
第二步：在24.7g(68. 2mmol)1-(2-氨基-4-环已基氧基蝶啶-6-基)-2S-甲氧基甲氧基丙烷-1-酮(化合物(1))中加入甲醇50mL、3mol/L盐酸250mL,在 50℃下搅拌3小时。通过氢氧化钠水溶液使反应液为pH=7,过滤取得结晶,减压干燥,获得S-乳酰蝶呤15.1g(64.2mmol,收率94%)。
第三步：在500mg(2.13mol)S-乳酰蝶呤中加入甲醇125mL、三乙基胺2.08mL(14.9mmol)、8.4% Pd/C(Ph2S)(含水50%)250mg,在外温40℃进行加氢反应3小时。反应完成后,将反应液在室温下、空气中搅拌1小时后,从反应液中滤出催化剂,进行减压浓缩,通过快速色谱法将粗生成物精制,获得L-墨蝶呤296mg(1.25mmol,收率59%)。1H NMR(DMSO-d6):δppm=1.21(d,3H,J=6.6Hz),4.11(s,2H),4.89(d, 1H,J=6.6Hz),5,10(quin.,1H,J=6.6Hz),6.81(br-s,2H),7.51(s,1H),10.26(s,1H)[3]。
参考文献
[1]CHO YR, KIM SH, KO HY, et al. Sepiapterin inhibits cell proliferation and migration of ovarian cancer cells via down-regulation of p70S6K-dependent VEGFR-2 expression.[J]. Oncology reports,2011,26(4):861-867. DOI:10.3892/or.2011.1335.
[2]MALARVANNAN PANNIRSELVAM, VALERIE SIMON, SUBODH VERMA, et al. Chronic oral supplementation with sepiapterin prevents endothelial dysfunction and oxidative stress in small mesenteric arteries from diabetic (db/db) mice[J]. British Journal of Pharmacology,2003,140(4):701-706. DOI:10.1038/sj.bjp.0705476.
[3]白鸟制药株式会社. 墨蝶呤和四氢乳酰蝶呤的制造法:CN201380022709.5[P]. 2015-06-24.