为什么DNA要保存在TE缓冲液中?如果缓冲液中不加EDTA行不行?

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一般长期保存DNA,贮存在TE缓冲液中比较好。 TE为含EDTA的Tris-HCl(PH 8.0)缓冲液:其中比较关键的成分是EDTA,日常环境中不可避免的存在DNase,而DNase的活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。TE中含有的EDTA可以螯合金属离子,从而使DNase失活。而Tris-HCl的作用主要是维持一定碱性PH值,有助于DNA的溶解和稳定。 不加EDTA也是可以的,而且EDTA会影响下游酶切,连接反应以及质粒转染进细胞的效率,如果接下来要做这些实验是应该避免使用含EDTA的缓冲液的。短期储存DNA也可以使用ddH2O,有助于DNA连接等效果。

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