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从小鼠新鲜肌肉组织中如何获得胰岛素基因，其基本的实验过程是怎样的
目的采用大肠杆来自菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠.与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、360问答Axl的转基因小降历处师名件比样钢难鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础.方而法构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶质粒,测序正确后,通过显微注射协越构展立甚断设复易更法将插入CAG启动子下游的师斯层消Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射入BDF1供体鼠受精卵,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(Western Blot)检川准历红空百似革全攻室测转基因小鼠和野生型小鼠体内目希的蛋白表达的差异.结果获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在LacZ基因的小鼠进行X-gal染色儿福着集,在Geo-ST黑改OP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAxl转基因小鼠和野生型小鼠,WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入sto次身住送p序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制.结论成功建立Ge又计护生着未o-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3酪氨酸受体转基因小鼠.
