为什么纯化是总是先用DEAE-cellulose再用Sephadex

那上鲁整倒不一定。不同蛋白，不同目的，会有不同的纯化程序。
离子交换和分子筛没有确定的先后顺序。
一般来说，用Sephadex 可以除盐，放在离子交换后是合理的，正好除去上一步洗脱的多余盐分。