DNS法测定葡萄糖标准曲线为什么要加浓硫酸和苯酚,还要不要加DNS试剂。 测定样品还原糖时加硫酸苯酚?

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没有加浓硫酸啊。10mg/mL标准葡萄糖溶液:精密称取无水葡萄糖1.0000置80mL蒸馏水中搅拌溶解,待完全溶解后定容至100mL。标记为10mg/mL的标准葡萄糖溶液,同时标记配制日期,4℃条件下保存。DNS试剂的配制称取3,5-二硝基水杨酸31.50g缓慢加入5000mL蒸馏水中,不断搅拌,水浴至45℃,逐步加入1000mL****溶液(e),不断搅拌至溶液清澈透明(在加入****溶液过程中,溶液温度不要超过48℃)。再逐步加入四水酒石酸钾钠910.0g、苯酚25.0 g、无水亚硫酸钠25.0 g,继续45℃水浴加热,同时补水3000mL,不断搅拌,至上述物质完全溶解后,冷却至室温,并定容到10000 mL。用滤布过滤,将滤液储存于棕色瓶中,标识名称和配制日期,避光,室温保存7天后可以使用。有效期6个月。 分析步骤:标准曲线的绘制:取8支试管按下表加入相关试液后再加入1.5mLDNS试剂,充分摇匀,置沸水浴中反应5min。迅速冷却至室温,用水定容至5.0mL,用0号试管试液作对照,在540nm波长下测其它各试管试液的吸光度。以吸光度为纵坐标,以葡萄糖含量为横坐标绘制标准曲线。试管号 0 1 2 3 4 5 6 7缓冲液加入量(μL ) 1000 990 985 980 975 970 965 960葡萄糖标准液加入量(μL ) 0 10 15 20 25 30 35 40葡萄糖含量(μg) 0 100 150 200 250 300 350 400

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