方法提要
试样用酸分解，在pH8.4～9.8的氨性介质中，以柠檬酸铵为配位剂，铜与双环己酮草酰二腙生成蓝色配合物，在分光光度计上，于波长610nm处，测量吸光度。本法适用于0.002%～5%铜的测定。
仪器
分光光度计。
试剂
氟化铵。
盐酸。
硝酸。
硫酸。
氢氧化铵。
柠檬酸铵溶液(100g/L)。
氢氧化铵-氯化铵缓冲溶液(pH9.3～9.4)称取40gNH4Cl，加入40mLNH4OH，用水稀释至1000mL，摇匀。
双环己酮草酰二腙溶液(简称BCO溶液)称取2gBCO溶于500mL乙醇及500mL热水中，温热溶解，用水稀释至1000mL(必要时过滤)。
铜标准储备溶液ρ(Cu)=1.00mg/mL配制方法同本章40.3.1碘量法。
铜标准溶液ρ(Cu)=100.0μg/mL由铜标准储备溶液逐级稀释配制，介质φ(HCl)=4%。
校准曲线
移取0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL铜标准溶液(100.0μg/mL)，分别置于50mL容量瓶中，加水20mL，加5mL柠檬酸铵溶液，相应加入1mL(1+1)NH4OH［分取10mL试液，加1mL(1+1)NH4OH;分取20mL试液，加2mL(1+1)NH4OH］，加10mLNH4OH-NH4Cl缓冲溶液，再加5mLBCO溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置20min后，在分光光度计上，于610nm波长处，用0.5～2cm比色皿，以试剂空白作参比，测量吸光度，绘制校准曲线。
分析步骤
称取0.1g(精确至0.0001g，称样量视铜含量而定)试样，置于100mL烧杯中，用少许水润湿，加盖表面皿，徐徐加入10mLHCl，摇动，置于电热板上加热数分钟，稍冷，加5mLHNO3，继续加热使试样分解完全(如有黑色残渣，可加入少量氟化铵助溶)。取下稍冷后，加入2mL(1+1)H2SO4，并用水冲洗杯壁，洗去表面皿，继续加热蒸发至白烟冒尽。趁热加入20mLHCl及20mL水，加热使盐类溶解，冷却，移入50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，放置澄清。吸取上层清液10.0mL置于50mL容量瓶中，加入5mL柠檬酸铵溶液和1mL(1+1)NH4OH，然后按校准曲线分析步骤操作，测得铜量。
铜含量的计算公式同式(40.2)。
注意事项
1)在试样测试条件下，铜的含量在0.2～4μg/mL符合比耳定律。存在柠檬酸盐时显色10～30min后颜色达到最深，可稳定5h以上。
2)最适宜的显色酸度为pH8.4～9.8。pH10时，试剂自身很快分解。
3)在50mL分析液中，铁在40mg以下，钙、镁、铝、钾、钠在10mg以下，铬(Ⅵ)、砷、锑、钼、汞、铋、铅在1mg以下，铬(Ⅲ)、钒、钨、铌、钽、铍、镧、钍、钇、锡、铊、铟、铈、铀、镍在0.2mg以下，钴在0.1mg以下均无干扰。
