将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌(Escherichia coli)用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。大肠杆菌原核表达是实验室常用的重组蛋白合成方法,具有易生长控制,成本低廉,操作简单等特点。但是由于大肠杆菌表达的蛋白缺少糖基化和修饰,磷酸化和修饰以及翻译后加工,所产生的蛋白一般不具有生物活性,但是其免疫位点存在,所以对于我们以后免疫产生抗体以及试剂盒的调试不存在影响。
其基本步骤如下:1、获取目的基因;2、构建重组表达载体;3、获取含重组表达质粒的表达菌种;4、诱导表达;5蛋白纯化。