ELISA实验结果显色淡灵敏度偏低是什么原因?

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回答者:网友

您好,ELISA斤司机背算阳念切成次在实验结果显色淡灵敏度偏360问答低原因有以下几种分别是:

原因1:试剂盒未充分平衡,

解决办法:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。

原因2:样品不适合做ELISA检测   

解决办法:样品一般选择培养上清、血清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条技点手满配孔过件(例如稀释液的成分)。

因3:酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥

决办法:防止板过于干燥。

原因4:包被抗体遭到破坏

解决办法:操作温和,移液枪不能碰到孔底。

原因5:样本和抗体孵育条件不合适

解决办法:按照说明书条件,建议孵育过程中全程振荡孵育。

原因6:洗涤浸泡时间过长

解决办法:按照说明书操作,勿人为增加浸泡时间。

原因7:偶联HRP试剂污染

解决办法:弃去试剂,重新配置。

原因8:错误的误稀释偶联HRP试剂

解决办法:弃去试剂,重新配置

原因9:TMB底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优皮照客备化孵育时间

解决办法:确定合适部在的提点收南浓收的孵育时间人为判定-最高浓度S1出现深蓝色,S4-5有淡蓝色。或机器判定620 nm波长下测定OD地画末规控斗言值达到0.6-0.65。

原因10: 样本浓度过座各伤话庆盟烈据胶雷高或存在基质效应

解决办法:建议做不同稀释倍数,确认样本最佳稀释倍数。

原因11:酶标仪滤光片设置有问题或者波长选择不对

解决办法:确刑方张属团价短课具让口认仪器设置及选择正括或参确的波长检测。

原因12: 酶标板不适合做ELISA

解决办法:不能使用细然示好抓局后胞培养板,建议使用ELISA哥通专用高吸附力板子。


科 润 达 生 物 提供解答:总结为避免显色淡灵敏度低,需注意以下几点:

1、 常规ELISA试剂盒平衡至30min;

2、 检测抗体、偶联HRP请按意矿晚未蒸含极基说明书稀释比;

3、 样本、抗体孵育条件(温度、转速),请根据说明书;

4、 控目固厂洲斤站制TMB底物显色时间。

希望能帮到你。


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