去百度文库,查看完整内容>
内容来自用户:姊梓seeing
实验十染色体畸变试验
可用末梢血淋巴细胞,或人和哺乳动物体细胞系作为材料,常用的
体细胞系有中国地鼠卵巢细胞(CHO),中国地鼠肺成纤维细胞(V79和CHL),人胚肺2倍体成纤维细胞等。
仅格早护自静体矛提给这里介绍外周血淋巴细
胞为对象的染色体畸变的试验方法。
1.实验原理
外周血中
香小淋巴细胞几乎都处在细胞增殖周期的G1期或G0期(不同于体外培养的体细胞),一般条件下是不会再分裂的。当在培养物中加入适量的
合针还李歌此PHA,在37℃下,经52~72h的培养,淋
河前论巴细胞开始转化,进入细胞增殖周期,此时可获得大量的有丝分裂
冷的细胞。再经过秋水仙素处
史湖建并获划理,低渗、固定,即可在
显微镜下观察到良好的中期染色体分裂相。电离辐射,化学
有害物质作用于机体或体外细胞,均可引起细胞染色体的损伤,且与剂量(浓度)呈
良好的线性关系。因此,染色体畸变已用于电力辐射事故的生
回参棉助鱼父护见热诗物计量估算。
2.方法与步骤
(1)试剂
RPMI-1640培养液,含20%小牛血清。
肝素:
每支含肝素12500U,使用时用生理盐水配成
500U/ml,4℃冰箱内保存备用。
秋水仙素:配成40
鲁确科弱题作德老讲铁ug/ml浓度。称取秋水仙素4mg,溶解于100ml 0.85
治进风渐员%Nacl溶液中,经6号细菌漏斗过滤,
集黑4℃冰箱内保存。使用时吸取0.05或0.1ml加入
到5ml细胞培养物中,其终浓度为0.4~
0.8ug/ml。双抗:青霉素100U/ml
验到(