染色体畸变实验

网友 1

最佳答案

回答者:网友
去百度文库,查看完整内容>

内容来自用户:姊梓seeing

实验十染色体畸变试验
可用末梢血淋巴细胞,或人和哺乳动物体细胞系作为材料,常用的体细胞系有中国地鼠卵巢细胞(CHO),中国地鼠肺成纤维细胞(V79和CHL),人胚肺2倍体成纤维细胞等。仅格早护自静体矛提给这里介绍外周血淋巴细胞为对象的染色体畸变的试验方法。
1.实验原理
外周血中小淋巴细胞几乎都处在细胞增殖周期的G1期或G0期(不同于体外培养的体细胞),一般条件下是不会再分裂的。当在培养物中加入适量的合针还李歌此PHA,在37℃下,经52~72h的培养,淋河前论巴细胞开始转化,进入细胞增殖周期,此时可获得大量的有丝分裂的细胞。再经过秋水仙素处史湖建并获划理,低渗、固定,即可在显微镜下观察到良好的中期染色体分裂相。电离辐射,化学有害物质作用于机体或体外细胞,均可引起细胞染色体的损伤,且与剂量(浓度)呈良好的线性关系。因此,染色体畸变已用于电力辐射事故的生回参棉助鱼父护见热诗物计量估算。
2.方法与步骤
(1)试剂
RPMI-1640培养液,含20%小牛血清。
肝素:每支含肝素12500U,使用时用生理盐水配成500U/ml,4℃冰箱内保存备用。
秋水仙素:配成40鲁确科弱题作德老讲铁ug/ml浓度。称取秋水仙素4mg,溶解于100ml 0.85治进风渐员%Nacl溶液中,经6号细菌漏斗过滤,集黑4℃冰箱内保存。使用时吸取0.05或0.1ml加入到5ml细胞培养物中,其终浓度为0.4~0.8ug/ml。
双抗:青霉素100U/ml验到

我来回答