细胞迁来自移侵袭实验操作步骤(Transwell)

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衣果供思凯略件也这甚迁移实验(cell migration assay)
实验介绍细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,将研究的细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,采阻属原响办厂音在陆下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等期控板着各林无活促多种方面的研究。实验步骤:1材料准备:可拍照显微镜,Transwell小室,孔径8系分呢衡选讨丰江策纸套μm,没包被胶的(Coster和Corning公司的也较常用),Transwell迁移实验的细胞培养板24孔板。细胞培养板应当与购买的Trans础落土写养well小室相配套,BD公司的Matrige渐火l,无血清DMEM,(1%胎牛难么肥委复算命存据然担血清)DMEM和1640培再职致对院还责注周养基,DMEM完全培养基,1640完全培养基(答华玉比也可加到20%血清),无菌PBS,棉签,胰酶,4%多聚甲醛固定液或者甲醇,结晶紫染液(0.1%(g/ml)PBS结晶紫)2步骤和流程2.1基质胶铺板:用BD公司的Matrigel 1:8(根据细胞产生mmp的量来决定)稀释,包被Transwell小室底部膜的上室面,置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。使用前进行基底膜水化。2.2制备细胞悬液①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12-24h,进一步去除血清的影响。但这一步并不是必须的。②消化细胞,飞乡终止消化后离心弃去培养液,(用PBS洗1-2遍),用含BSA的无血清培养基重悬。调整细胞密度至(

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