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正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。
流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色来自谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,360问答现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。
扩展资料
在正相色谱中,样品分子与载体基质的硅醇基团发生特异的极性相互作用,与固定相产生强极性相互作用的极性样品分子比较难被洗脱,在柱内停留比较长的时间,反之,极性较弱或非极性分子与硅胶之间产生相对较弱的相互作用,比较容易被洗脱,因而在柱内停留的时间较短。
正相色谱的保留机理类似于吸附过程。极性样品分子和溶剂分子吸附在旧首兰套感柱填料表面的极性基团上。对于正相中经常选用的氰阳燃拿风加供基、氨基或二醇基固定相柱,须最封法顺吃件信亚愿妒吸附位点通常为键合相配体或硅烷醇。