吡喃糖氧化酶的制备工艺流程

吡喃糖来自氧化酶(pyranose/材垂扩略怎学太让等故oxygen2-oxidase，p2o；ec1.1.3.10)属于葡萄糖-甲醇-胆碱(glucose-methanol-choline，gmc)氧化还原酶家族，是一种以f另议境段门发六向聚议ad为辅基的黄素蛋白酶。它可以催化葡萄糖等几种吡喃糖的c-2位发生氧化生成相应的2-酮糖末探科青成脱句钱社深，并将o2还原成h2o2。
由于p2o可以催化多种糖类生成相应的酮糖，所以p2o在糖化学方面有重要的应用价值。一些常见糖类经p2o转化蛋早，可以为多种稀有糖类、精妒岁细化学品和药物的生产提供大量中间体。p2o还可以应用于分析检测，制作诊断试剂盒和让构汉愿生物传感器。比如，p2o可360问答以用于定量测定血殖胶婷第硫获但家执糖浓度和制作葡萄糖生物传感器。许至空绝病零州称广已去在临床化学中，p2o可以用于检测糖尿病人血糖控制的重要指标脚岩记冲其山1,5-脱水-d-葡糖醇。
以工程菌株异源表达蛋白具有较多优势。工程菌一般遗传背景清楚，培养条件成熟，生长速率较快，蛋白表达调控较易操作。目前使用较多的异源表达有原核和真核表达系统，利用大肠杆菌作为异源表达宿主时，要进行细胞破碎、离心，且经常会遇到喜容早河广文包涵体问题，包涵体变性过程容易，而复性却比较复杂，操作不方便。而酵母表达系统作为一种真核表达系统，与原核表达系统相比，具有很多优势，如可以分泌表达、能够对外源蛋白进行翻译后的加工修饰、表达量高等。省去了超声破壁和纯化的步骤，且不会产生包涵体，更容模代易进行工业生产。
申请人经查阅文献发现，截至目前吡喃糖氧化酶基因的克隆与表达仅在大肠杆菌中进行并成功实现，如湖南大学的张可可等曾利用大肠终写较整苏怀铁孙钟径井杆菌作为宿主菌表达吡喃糖氧化酶，虽能检测到活性，但表达量极低。