冻融法制备农杆菌感受态细胞,并且转化质粒相关问题。

我使用氯化钙法制备农杆菌感受态细胞,随后转入质粒,在有抗生素的LB上涂板培养发现有单菌落长出,挑取单菌落摇菌,PCR,跑胶,发现存在目的基因条带,还挺清晰的,但是我的实验出现的问题是使用未转化质粒的感受态细胞在同样的LB上涂板也长出单菌落,请问各位,这种实验结果能不能说明我的实验是成功的。
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回答者:网友
实验结果不能肯定的说明结果是成功的,做实验的阴性对照也很重要,阴性对照必须做出阴性结果。如楼下的网友所说,可能是你的感受态菌被质粒360问答污染了。现在我回答一下一汽你的 追问吧:“未转化质粒的感受态细胞在同样的L证但派包丰划止占B上涂板也长出单菌落井开医局谓欢跟营认何倒”,那么这个长出的单菌落你叫讨有没有做菌落PCR的普走鉴定?如果你没有做菌落PCR的鉴定,还有一种可能就是你的板子上的抗生素浓度不够,导致长出了菌,这个菌到底含不含有你重斤语与顶速的目的质粒,要做PCR鉴定,不要光看菌落长出与否。建议你把板子的抗生怕都孙素浓度提高,同时看看未转化质粒的感受态细胞在同样的LB上涂板也长出的单菌落的器拿切染手PCR鉴定结果,从而宜的节渐判断是否仅仅是感受态被质粒污染了

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