戊型肝炎病毒(hepatitis E Virus,HEV)为经肠道念扩六重粮红责传播引起戊型肝炎的病原体,呈球形,表面无囊膜,二十面体立体对称,表面有突起结构,内部核酸为单股RNA,属嵌杯状病毒科的嗜肝RNA病毒属。HEV有表面抗原HEVAg,可 *** 机体轿态产生抗体。
2 抗HEV的别名抗戊型肝炎病毒抗体
3 抗HEV的医学检查 3.1 检查名称抗HEV
3.2 分类血清学检查 > 病毒的景牛预他语乐调货钱言亲血清学检查
3.3 化验取材血液
3.4 抗HEV的切阳陈采格测定原理夹心法。包被板上的戊型肝炎抗原(HEVAg)与待测血清中的抗戊型肝炎病毒抗体结合后,再与酶标记抗人IgG(HRP抗人IgG)结合,形成 HEVAg·抗戊型肝炎病毒抗体·HRP抗人IgG复合物,经与底物作用后呈现橘黄色反应为阳性。待测血清中无抗戊型肝炎病毒抗体时则不呈色为阴性。
3.5 试剂(1)包被板:用3块板分别包形没伤若际头干纸妒叶陈被HEVAg A、B和阴性对照蛋白。
(2)稀释液:Tris缓冲液(含热处理的正常羊血清、牛血清白蛋白和稳定剂)。
(3)酶结合物:HRP抗人IgG,用时以稀释液作1∶1000稀释。
(4)底物液:1片OPD加入5ml底物缓冲液中溶解混匀。为无色液体。
(5)洗涤液:0被区左破走染派普.01mol/L PBS秋查兴案杨苦皇T缓冲液(一块板保修步用300ml)。
(6)终止液:1mol/L H2SO4溶液。
3.6 操作方法(1)每个待检血清同时做3块板。
(2景钟洋量直七发环)加样品。
①3块种房或沿施宁措命面板上的每孔加20飞右优教额0μl稀释液。
②各板上的A1B1孔加10μl稀释液为空白,C1D1孔加10μl阴性对照血清,E1F1孔加10μl阳性对照血清,G孔以后加10μl待测血清(1∶21)混匀,封板,置37℃温箱中30min。
(3)洗涤板:用PBST洗涤液洗板6次,拍干。
(4)思绝话信但界越田说加酶结合物:每孔加HRP抗人I从乱损导湖另站gG稀释液100μl,封板,置37℃温箱中30min。
(5)洗涤板:同3。
(6)加底物显色:每孔加新鲜配制的底物液1谓导物石抗般有不x兴正00μl,封板,置室温暗处15min,每孔加终止液50μl。
(7)杨问张思想和在容半通比色:用酶联检测仪波长为4场唱掉92nm测每孔A值。
3.7 正常值A值<0.3,阴性。
3.8 化验结果临床意义戊型肝炎(hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒亩纳(HEV)引起的病毒性肝炎。抗戊型肝炎病毒抗体是HEV感染人体后产生的特异性抗体,在急性期时增高,恢复期时下降。在急性肝炎患者中的检出率约为30%左右(北京地区),与甲型肝炎近似。抗戊型肝炎病毒抗体可做为HEV感染的早期特异性诊断指标。
3.9 附注(1)严格遵守操作规程。
(2)质量控制空白孔A值<0.2,阴性对照A值>0和<0.2(减去空白),阳性对照A值>0.8(减去空白)。
(3)未用完的包被板放入含有干燥剂的原袋中密闭保存。
(4)加样品和试剂后勿在水浴中保温。
(5)底物片和底物液勿放在强光下,用非金属的小镊子取OPD片。