胰酶消化时间不用那么长吧,它使细胞间结合处蛋白降解,细胞变圆脱落就行,然后终止消化,离心,PBS洗一遍,加你的细胞裂解液,90°热浴(使蛋白酶失活,当然胰酶也失活了),测蛋白浓度。
贴壁细胞我不用胰酶消化,直接PBS洗一遍,然后冰上操作,加入裂解液后冰上裂解5-10分钟,使其裂解充分,然后直接90°热浴。这样更省事,效果也好。