抑菌试验中怎样制作符合要求的菌悬液?

我做微生物抑菌实验室,用到金黄色葡萄球菌,白色念珠菌,大肠杆菌三种菌,其中有一步是制作菌悬液,要求的浓度是1*10的4次方到9*10的4次方,也就是回收菌数是1到9个,我应该怎样做才... 我做微生物抑菌实验室,用到金黄色葡萄球菌,白色念珠菌,大肠杆菌三种菌,其中有一步是制作菌悬液,要求的浓度是1*10的4次方到9*10的4次方,也就是回收菌数是1到9个,我应该怎样做才能做出符合要求的菌悬液呢,说具体点,谈谈自己真是的经验,不要复制哦,谢谢 展开
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操作步骤
l.编号
取无菌平皿9套,来自分别用记号笔标明10-技调方相右帝苗1---10-9。另取6支盛有4.5mL无菌水的试管,依次标是10-1---10-9。
2.稀释
用lmL无菌吸管吸取lmL已充分混匀的大肠杆菌菌县液(待测样品),精360问答确地放0.5mL至10-1的试管中,此即为10倍稀释。将多余的菌液放回原菌液中。
将10-1试管置试管振荡器上振荡,使菌液充分混匀。另取一支lml吸管插入10 1试管中胞多测告儿念强服关来回吹吸菌悬液三次,进动境凯展汽打一步将菌体分散、混匀。吹吸菌液时不要太猛太快,吸时吸管伸人管底,吹时离开液面,以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。用此吸管吸取10-1菌液lmL,精确地放0.5mL至10-2试管中,此即为100倍稀释。其余依次类推。 放菌液时吸管尖不要碰到液面,即每一支吸管只能晶境怀误古领权评接触一个稀释度的菌悬液,否则稀释不精确,结果误差较大。
3.取样
用9支1mL无菌吸管分别吸取10-1至1难怀0-9的稀释菌悬食是否较多广年液各lmL,对号放入编好号的无菌平皿中,每个平皿放0.2mL。不要用lmL吸管每次只靠吸管尖部吸0.2mL稀释菌液放入平皿臼,这样容易加大同一稀释度几个重复平板喜久矛间的操作误差。
4.倒平
尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒入融化后冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基约15mL/平皿,置水平位置迅速旋动平皿,使培养基与菌液混合均匀,而又不使培养基荡出平皿或溅到平皿盖上。
由于前热坏包件细菌易吸附到玻璃器皿表面,所以菌液加入到培养皿后,应尽快倒入融化并于已冷却至45℃左穿温兴胞沉右的培养基,立即摇匀,否则细菌将不易分散或长成的菌落连在一起,影响计数。 待培养基凝固后,将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养。
5.计数
培养48h后,取出培养平板,算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数,并按下列公式进行计算, 每毫升中菌落形成单位(cfu)=同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数×5
以上仅供参考

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