病毒名称:黄瓜花叶病毒—西番莲分离物Cucumbermosaicvirus-passifloraiso外整百么慢程鸡吗坚所lates(CMV)。
分类地位:黄瓜花叶病毒属Cucumovirus,雀麦花叶病毒科Bromoviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.010.0.04.001。
病毒提纯:经PEG沉淀、蔗糖垫离心、10%~40%蔗糖梯度离心,获得较为纯化的病毒。具体程序:采集接种两周的烟草病叶,100g叶组织加100ml0.5mol/L柠檬酸缓冲液(含5mmol/LNa2EDTA和0.5%巯基乙醇,pH6.5),低温捣碎、匀浆,加100ml氯仿搅拌30s。低速离心(12000r/mi心固费n,10min),取水相,加10%(W/V)PEG(分子质量6000u)和0.1mol/LNaCl在0~4℃下搅40min,低速离心(12000r/min,10min),沉淀加50ml5欢医突mmol/L硼酸缓冲液(含市析0.5mmol/LNa2EDTA和2%Triton-100,pH9.0)悬浮,0~4℃下搅拌30min。悬液低速离心(16000r/min,15min),上制余控备客茶提预功清液经20%蔗糖垫离心(HitachiP42A转头,40000r/min,1.5h)。沉淀加2ml5mmol/L硼酸缓冲液(深小工渐北给缺条卷象种含0.5mmol/LNa2EDTA,pH9.0)悬浮。悬液经10%~40%蔗糖梯度离心(HitachiRPS40T转头,25000r/min,2h),收集乳白色病毒带,超离心脱糖,沉淀用少量0.01mol/L磷标和雷推酸缓冲液(pH7.0)自府另火光体末块悬浮,即为病毒提纯液。
病毒殖印理化特性:
①病毒粒子。球形,直径大小比通常的黄瓜花叶病毒粒子要小。各国测定不同,我国测定的直径为22nm、24~26nm。巴西测定为24nm,津巴布韦测定为18~20nm。A260/A280为1.72。
②核酸距武送真静输美娘。单链RNA,三分体病毒。
③蛋白。外壳分子质量约27ku。
株系:侵染西番莲的CMV分离物或株系有许多。徐平东根据鉴别寄主反应和血清学关系,将我国侵染西番莲的5个黄瓜分离物分为2大类群。第一类群(包括分离物PE、PE2、PC和PF)采坚素凯染属CMV亚组Ⅰ,第2年兵过类群(包括分离物PEf)属CMV亚组Ⅱ。有些分离物引起顶死症状。不同的分离物症状不完全一致,如PE2分离物引起的是顶死症状。