普通青霉素主要是革兰氏阳洲张钟别性菌，某些半合成的如阿莫西林增加了对阴性菌的活性。
青霉素对大多革兰阳性菌{革兰阳性球菌（溶血性链球菌，肺炎球菌作用强；对肠球菌作用较差），革兰阳性杆菌（白喉杆菌，炭疽杆菌，革兰来自阳性厌氧杆菌，产气荚膜杆菌，破伤风杆菌难辨梭菌，接只均烈黑同丙酸杆菌，真杆菌，乳酸杆菌）
革兰阴性球菌，改氢存促雷板飞掉烧（脑膜炎球菌，淋球菌）、螺旋体（梅毒螺旋体，钩端螺旋体，回归螺旋体，鼠咬热螺菌，放线杆菌）有效抗菌机制。
