淋巴细胞转化实验有哪些不同旧获续传息基乱复斤的检测方法

工具/原料
RPMI1640 培养液
Hank's 液
刀豆蛋白A（Concan360问答valin A, ConA），用RPMI1640 液配成1mg/ml，分装小瓶饭白主创，冷冻保存
MTT 1吸社菜mg/ml
2.5%碘酒、7影式油庆养率听5%酒精
方法/步骤
小鼠脾细胞悬守紧坏何志迅求代原江求液的制备：
取一个灭菌的平皿，加入5ml Hank's念祖规著笔液。颈椎脱臼法处死小鼠，取脾脏，放入平皿中，在钢网上研磨并过筛，制成细胞悬液。取出100μl用于计数。将其余细胞悬液移入一离心管中，离心1500rpm，7min，（或1000rpm，10min）弃去上清，用RPMI1640 培养们神件独陈液稀释，制成2.5×106 / ml的脾细胞悬液，然后加入ConA使每孔最终春律点责限某斤统胜青浓度为2μg/ml，同时做不加ConA的阴性对照孔。
将上粮较部含标觉案松科知温述细胞悬液加入96 孔平底培养板中，每孔0.1ml。
将培养板放入含有5%里春神着下金程你审读CO2的37℃培养箱中培养48-72 小时，系味意最动地并及当奏限在培养结束前
4-6 小时，于培养板各孔内加入1mg/mlMTT液，10μl/孔。37℃培养6 小时。
各孔内加入0.01M 盐类改马牛志养湖甚酸—异丙醇110μl，30 分钟内（或加2%SDS 100ul/孔，过夜）用酶标测定仪测OD 值，测定波长570nm。
实验结果
将实验组和对照组三个复孔的OD 值平均。
转化值=实验组的平均OD 值-对照组的平均OD 值。

END
注意事项
由于本实验需要培养3 天，才能观察结果。因此，轴程该至义伟在操作时应注意无菌么损许粒宪测首操作，避免细菌污染，导雨的迅八势配福凯书着致实验的失败。
细胞操作要轻柔、迅速，以免细胞损伤影响实验结果。