用镍柱纯化带his标签的蛋白,蛋白过镍柱时忘记加wash buffer就加elute buffer,

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回答者:网友
意思是没有先用wash
buffer清洗镍柱,就直接用elute
buffer洗脱了么。这样的话洗脱效果会比较差一些,洗脱的蛋白纯度会明显降低。
虽然his标签的蛋白结合镍柱时特异性非常高,但因为种种原因总会有一些杂蛋白非特异性吸附在柱子上,所以要先用wash
buffer冲洗掉这部分杂蛋白,再用elute
buffer洗脱,已达到最好的纯化效果。

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