镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和特平衡液怎么配？
我第一次做蛋白，请尽量说详细点我手上只有一个笔记，是这样写的平衡液：50mM磷酸钠300mM氯化钠洗脱液：150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有，求指点：1.平衡液只有这两种成分这么简单吗？... 我第一次做蛋白，请尽量说详细点我手上只有一个笔记，是这样写的平衡液：50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液：150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有，求指点：1.平衡液只有这两种成分这么简单吗？2.洗脱液是水加咪唑还是平衡液加咪唑呢？ 展开
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回答者：网友
1. 360问答平衡液是缓冲液，应该是PB或PBS，这个配方很多手册可以查，注意亲和层析的pH是一个比较重要的参大曲示可酒理普数，会影响洗脱过程的，有一种镍宪班柱洗脱方法就是高pH上样，器句较毫席地特第形低pH洗脱。
2. 洗脱液一般是平衡Buffer中加入咪唑，没有缓冲的体系有可能造成蛋白的变性。
