国标法液相色谱检测辣素含量用甲醇做流动相,而我实验室用乙腈,用这两种流动相的区别是什么?
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回答者:网友
说起反相色谱中 甲醇和乙腈二者的区别我总结有以下几点,供参考:
1,在压力方面,乙腈的压力更低,25cmC18柱,1ML/MIN的流速,30度柱温,乙腈:水50:50,大约压力是40-70吧(一般情况下), 而用甲醇替换下乙腈的话,压力估计要在110-150之间,如果柱内径更小,流速更大的话,压力容易超过200.
2,在溶剂吸收方面。当波长以220或更多 低波长时,用甲醇和乙腈分别与水打梯度的时候能看出,甲醇的基线飘的更大。
3,分离效果方面。多数情况下用乙腈在峰形更窄,分离度更高。
4,价格方面,乙腈比甲醇贵的多,而乙腈的毒性也更高。
5,稳定性方面。甲醇分子上有活泼H,所以更易与一些活性样品发生反应,比如甲酯化。
综合来说, 用乙腈比甲醇有明显的优势,现在实验室用乙腈的更多一些。不过,甲醇由于其成本更低,在一些经过方法 验证的成熟检测中,样品量很大的情况下,用甲醇能更经济些另;外一些国外实验室比较考虑毒性,也很多用甲醇做流动相的;还有就是用甲醇做流动相时,极个别样品难于用乙腈分离时有时会考虑甲醇的溶剂效应反而能把样品分离成功;再有就是用乙腈做流动相样品出峰过早,用甲醇能使样品有更大的保留。
我个人认为,能用的上乙腈,用的起乙腈,就不要用甲醇。乙腈在检测中出现的异常问题比甲醇少的多。