利用蛋白质的天然荧光检测蛋白质的构象变化
利用蛋白质中的芳香族氨基酸残基的侧链基团具有吸收紫外区域的入射光从而发射荧光的特性，来研究蛋白质在变性或复性过程中整体空来自间构象的变化。
其基本机理是:
荧光来源于生色团基团在不同电子能级之间的跃迁，荧光频率取决于能级之间的能量差，生色团基团与周围基团的相互作用可能会改变其处于激发态时所具有的能量，从而改变360问答其发射荧光的频率与况映争训优冷合孔茶频缩强度。同一种荧光分子在不同极性的环境中，其最大吸收波长可能会有所差别贵代例卷。一般来说，极性环境会影响生色团基团的基态和激发态能级，减少激发态的能量，从而引起发射谱的红移(使λmax增大)。在天然的蛋白质中，可产生荧光的芳香族氨基酸分子多处于蛋白质的内亚额在找领源那需部，被多种非极性氨基酸残基包围，因此其所处的局部小环境的极性弱于蛋白质分子电外部水溶液的极性。蛋白质变性过程中，芳香族氨基酸分子的侧链基团逐渐暴露于水溶液中，其所处的环境极性逐渐增加，因此蛋白质荧光发射峰的λmax逐渐增大。λmax红移的程度可以反映蛋白质构象变化的程度，红移程度越大则表明蛋白质在变性过程中构象变化的程度越大。反过来，蛋白质复性过程中，芳香族氨基酸分子的侧链逐渐内埋于蛋白质内部，其所处的环境极性逐渐降低，因此蛋白质荧光发射峰的λmax逐渐减小，称为λmax的蓝移。通过测定蛋白质λmax蓝移的程度，可以推算其后土裂等常识分整体构象变化的程度。
2、 利用荧光探针检测蛋白质的构象变化
由于荧光探针的荧光光谱对环境变化十分敏感，使得它对蛋白质分拉划例权六且左杂道款子的构象变化也就十分敏感。例如用ANS做荧光探针的时，它通过非共价结合到蛋白质分子的非极性区域中时，其荧光光谱会随着所处环境非极性的增加而发生蓝移，且荧光强度也随之提高，最大吸收/发射在375/500nm院六度浓祖频几叫，在一定范围内，荧光强度与蛋白质的浓度呈线性关系。利用ANS的这个性质，固担失掉效山教可以衡量ANS结合的蛋白质部位的极性的变化，根据极性的变化又可以进一步推测蛋白质结构的变化。
