我汗 你这没个师兄师姐啥的行红收吸加条唱传衣专么
质粒你自己买或者找别的实验室要去。。。
目的基因的引物设计用primer premier5
酶切位点和保护碱基自己去查
首先松满衡满很毛歌苦款用PCR从cDN费期消林鸡便A里面把你的目的基因扩增出破染刻山举将条送集父达来 然后跑琼脂糖胶回无古保深吃无皇转收 然后做酶切 切多久根据酶不同 把质粒载体也用相同的酶做酶切 然后两个都跑胶回收 然后用T4 DNA连接酶重每阶进行16度过夜连接 然后做转化 先把连接产物加到感受态的菌里面 冰上放30分钟 然后42度9罗语准孔风衡护担刻杆林0秒 再冰上2分钟 然后涂板
