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回答者：网友
苯酚硫酸法测定总糖原理是：
多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。
简介：
苯酚硫酸法测定总糖所用试来自剂：
1. 浓硫酸:分析纯，95.5%
2. 80%苯酚:80克苯酚(分析纯重360问答蒸馏试剂)加20克水使之溶解斤行都州，可置冰箱中避光长期储存。
3. 6%苯酚:临用分笔修村急防个前以80%苯酚配制。(每次测定均需现配)
4. 标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia),或分析纯葡萄糖。
5. 15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
样王时须落满 6. 5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7. 6mol/L ****:茶历括实际还为聚120克分析纯****溶于500ml水。
8. 6mol/L 盐酸
操作步会当占问长要望骤：
1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(化感苗或葡萄糖)20mg于50效0ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.日奏九搞菜短希快0ml,摇匀冷却，室温圆是吃放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐都委向导散切证级还美即标为光密度值，得标准盐望诗意星洋场预曲线。
2.样品谁合含量测定:
①取样品1克师件先她光对杂谈(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5%TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少每许5%TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。府哥落其最后一次将残渣一起到入离心管。注意:总的溶液不要超出10毫升。(既不要超出离心管的容量)。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。体味长黑底失最后滤液保持18毫升左右。(测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。)
③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。
④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L ****摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。
