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化工问答
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用酵母双杂交技术可以验证一个蛋白是否有同源二聚化作用吗?
就是把这个蛋白同时做到AD和DNA-BD上,然后共转酵母,可行吗?
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回答者:网友
将待测基因与Gal4或LexA或其他合适蛋白的DNA结合域融合构建诱饵质粒;将诱饵质粒转化缺
乏报告基因启动子的酵母细胞株中,选择被转化的酵母;再将文库质粒转化到酵母中。 酵母双杂交的文库筛选
通过报告基因的功能筛选相互作用的蛋白,从酵母中分离质粒然后转化E. coli ,从大肠杆菌中提取质粒并测序 ,在数据库中比对所测定序列与已知蛋白的同源性。
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