P1作用是悬菌,使菌体分散。
P2是强碱,作用是裂解菌体。
大提质粒和小提质粒来自的基本原理是一样的,都是通过一定的方法(如加碱裂解)使在细菌内大量扩增的质粒释放出来,经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA,最终将DNA提取出来。
配方是:
1 Mol/L Tris-Hcl(pH8.基临过扬套三矿精植染0) 25mL
0.5Mol/L EDTA-NaOH(pH 8.0) 20mL
20%葡萄糖 4360问答5mL
H2O 910mL
Rnase(RNA酶,zhi100U) 10-2油那盟小胡0uL
扩展资料:
用于大肠杆菌中质粒DNA的小量提取,它结合了尽培预天回备离低优化的碱裂解法,以及方便快捷的硅膜离心技术,具有高效,快捷的特点,能在30min内完成全部操作。利用试剂盒能从1-5mL过夜培养的大肠杆菌菌液中纯化钱格得到10-40μg高质量的质粒DNA(OD260/OD280=1.7-1.9),此质粒DNA非才紧威足精用例里球可直接用于DNA序列分析,各种酶促反应,P静行课减是军CR以及部分细胞系的转染等派者区。
其中用到三种溶液以及垂期相座家换妈国析服宜硅酸纤维膜(超滤柱)。 溶液Ⅰ:50 mM葡萄糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA,pH 8.0;溶液Ⅱ:0.2 N NaOH / 1%SDS; 溶液Ⅲ:3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸/75%酒精。
参考资料来源:百度百科-质粒抽提