多聚半乳糖醛酸酶(PG),能降解果胶使细胞壁破损.番茄果实成熟中,PG合成显著增加,能使果实交红变软,

请在图2-乙相应位置上:(1)提取目的基因①若已获取PG的mRNA.jpg" exsrc="http://c,观察细胞______现象来鉴别细胞壁是否再生.(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA,则可确定转基因番茄成功.(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,可用培养基进行筛选.培养24-48h后取样,在质量分数为25%的蔗糖溶液中,且能与______互补结合,基因表达载体中还需含有______,则起“缝合作用的酶是______.(6)在构建基因表达载体时,除了插入目的基因外://c://c
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(1)①已获取PG的mRNA,可通过逆转录或cDNA文库的方法获得目的基因.②基因转录的产物是mRNA,在转录时需要RNA聚合酶.目的基因两侧的黏性末端如图:③大肠杆菌繁殖快,因此将重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是大量复制目的基因(克隆目的基因).(2)植物细胞在质量分数为25%的蔗糖溶液中会发生质壁分离现象,这可以用来鉴别细胞壁是否再生.(3)反义RNA一般是指与编码链或有义链互补的DNA链编码的RNA,mRNA是由编码链或有义链编码的RNA,所以反义RNA和mRNA分子能互补成双链的RNA.由于核糖体不能翻译双链的RNA,所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合,即抑制了该mRNA的翻译;若转基因番茄的保质期比非转基因番茄长,则可确定转基因番茄成功.(4)获得的转基因番茄产生的种子(是有性生殖的后代,会发生性状分离)不一定保留目的基因,故要保持该优良性状,可采用无性生殖即植物组织培养的方法.(5)改造过程需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶;DNA连接酶分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶,这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端.(6)基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点;将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法.故答案为:(1)①逆转录(或cDNA文库)②RNA聚合酶 ③大量复制目的基因(克隆目的基因)(2)是否发生质壁分离(3)天然PG基因转录的mRNA 长(4)植物组织培养(5)限制酶和DNA连接酶 T4DNA连接酶(6)启动子、终止子、标记基因、复制原点 农杆菌转化法

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