荧光PCR绝对定量的标准曲线倍比稀释梯度一直不理想（用的进口枪头），从9次方稀释到0次方，2就不好了
以前师姐做的标准曲线很不错（0~9），后来新提质粒就再也做不好标准曲线了，数量级还可以，前面常数差很多，不知道是不是自己操作原因，已经很小心了，郁闷。。。求赐教
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回答者：网友
1.最好每次都做标准曲线。在益阳的情况下，天气、机器等不适很稳定
2.查看溶解曲线，看是否是单一尖峰，以判断引物是否合格
3.看扩增条件是否合适
4.看循环数是否在合理的区域内，控制稀释条件
5.锻炼自己的加样能力，又快又好
