植物组织中过氧化氢酶的活性测定—紫外吸收法
【原理】
H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化360问答氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度(A24死住代校翻业跳政0)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出使算督过氧化氢酶的活性。
【仪器与用具】
紫外分光光度计；冷冻离心机；研钵；容量瓶；刻布服离益属异滑成赵权度吸管；恒温水浴；分析天平
【试剂】
1. 0.05mol/LpH7.0磷酸缓冲液
2.0.2mol我模拉院应族远/LH2O2溶液：30%H2O211.36ml溶于磷手酸缓冲液中，定量至250ml。
3.0.05mol/LTris-Hcl缓冲液（pH7.0）
【材料】
正常生庆称矛长或经逆境处理的新鲜植物组织
【方法步骤】1.酶液提取：称取剪碎混匀的植物样品（如叶片等）1.00g置与预冷的研钵中，加入适量预冷的pH7.0磷酸缓冲液和少量石英砂冰浴研磨成匀浆后，转入10ml容量瓶中，并用缓冲液冲洗研钵数次，合并预致鸡状此远冲洗液，并定容到10ml。取提取液5ml于离心管中，治我存思考在4℃、15000g下离心1停己同非家众重宣5min，上清液即为过氧化氢酶粗提液。4℃精蒸春重械下保存备用。
2.CAT活性测定
（1）取10ml具塞试管，加2ml酶提怎结离喜未取液于沸水浴中加热煮死，冷却备用。
（2）取10ml具塞试管，3支为测定管（3个重复），1支为对照，按下表加入试剂：
表40-2紫外吸收法测定H2O2样品液配置表
管 号｜S1｜S2｜S3｜S4｜
Tris-Hcl｜1.0｜1.0｜1.0｜1.0｜
粗酶液(ml)｜0.1｜0.1｜0.1｜0.1(煮死酶液)
