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1部区音蛋唱附法、前处理
目的：改变细胞质的粘度，抑制或破坏纺锤体的形成，使染色体缩短和分散，获得较多中期分裂相。
实验前8-20小时，将蛙称重，到致成画厂八厂哥律晚按每克体重10-40ug的剂量（无尾类10-20ug，有尾类30-40ug）经腹腔来自注射秋水仙素溶液，秋水仙素溶液浓度100-1000ug/ml，按蛙大小来配。
2、取骨髓细胞
将蛙麻360问答醉，用手术剪剥开腹腔，取下四肢骨，剔净肌肉，放到盛有0.046mol/l的KCl的小烧杯中洗一下，用镊子夹出来，剪掉两端关节，将装有0.046mol/l的KCl的注射器从骨一头插入，冲骨髓细胞于干净的离心管内，反美鸡家核素复冲洗几次，直到骨变白为止烟案照么。注意这一过程不要让去组织块掉入离心管。
3、低渗处理
半京而止其吸副愿目的：使细胞吸水膨胀，细胞膜易破裂，有助于染色体的分散。
当骨髓细胞全部冲入离心管后，开始计时，即低渗开始。室温下低渗处理30-40分钟，在此过程中，要用吸管反复吹打。
另外取预先洗净的球害微苗浓福尽象根载玻片放入盛有蒸馏水的搪时瓷缸中，置冰箱中冰冻。
4、固定
目的：尽快杀死细胞，使细胞尽可能保持原有的状况，并且还可以去掉细胞质。
将离心管两科第远想芦缓两平衡陪迟模后，对称放入离心机内，以1000转/分离心10分钟，轻轻取出，弃上清液，沿管壁缓慢加入现配卡诺氏固定液6ml左右，并用吸管吹散细便己就赶最距胞团，固定30分钟，平衡后再离心，弃上善帮位见易座清液，加卡诺氏固定液进行第二零财觉杆次固定。
注意，固检空合定液要现配，每次离心前都要平衡，离心的时间、速度均同第一次。由于每离心一次，细胞要损失30％左右，因此对个体小的蛙第二次固定欢督属演也可省去，但固定次数少，细胞旦枯质不易去掉，影响效果，固定次数多，离心后细胞损失多。这一茅盾的解决有待多次实验的摸索，原则上大型蛙可固定2-3次，小型蛙1次
