lipo2000 转染哺乳动物细胞,效来自率不高怎么回事?

新手,刚刚接触细胞实验,学习转染,可是效率总是不高。师姐用同样的质粒,同一种细胞,转染的效率是很高的。我怀疑以下问题:1.细胞传代的次数较多。2.细胞生长的密度,我还是控制不好(贴壁的)。3.转染的操作:质粒+200uL培养基+lipo,混匀后静置30min,然后滴加到细胞中(不含血清的培养基)。请高手不吝赐教,谢谢!
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博凌科为解答:1、传代次数不是问题,不过传代次数多了细胞本身状态不好2、通常在细胞密度为70~80%时转染3、你的质粒加了多少ul?我转染是DNA、lipo各与oppti-medium混匀静置5min,再将两者混匀静置20min,滴加到细胞中

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