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Py-BODIPY-NHS ester

MCE 国际站：Py-BODIPY-NHS ester

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-D1106

CAS：201998-61-0

纯度：98.98%

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture and light *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：BODIPY 染料是一种具有强紫外吸收能力的小分子染料，其荧光峰比较尖锐，量子产率高。其对环境的极性和 pH 值相对不敏感，因此，在不同生理条件下相对稳定。由于其结构的非对称性， BODIPY 具有多种衍生结构产物。BODIPY 脂滴类染料可以很好的穿过细胞膜进入细胞内部，通过在细胞内的中性脂类上定位以进行特异性染色，因此，该染料可用于标记活细胞和固定细胞。

生物活性：Py-BODIPY-NHS ester 是一种细胞渗透性荧光能量转移探针。 Py-BODIPY-NHS 酯示踪剂产生强烈的细胞参与，并证明是 MET 激酶的最佳选择。活细胞能量转移技术可以对细胞内激酶靶标结合进行广泛的定量分析^[1][2]。 体外三苯基膦荧光染料（TPP 荧光染料）是一类新的光谱可变的线粒体靶向探针。 NanoBRET 590 SE (compound 2b) 是通过 TPP-胺与 BODIPY red^[3] 的 NHS 酯反应合成的。

体外：1.Py-BODIPY NHS ester 工作液的配制1.1 制备储存液用 382 μL 无水 DMSO 稀释 1mg Py-BODIPY NHS ester 去配制 10 mM 的储备液。注：Py-BODIPY NHS ester 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。1.2 工作液的配制用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Py-BODIPY NHS ester工作液。注：请根据实际情况调整 Py-BODIPY NHS ester工作液浓度，且现用现配。2. 细胞染色 (悬浮细胞) 2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。2.2 加入 1 mL Py-BODIPY NHS ester 工作液，室温孵育 5-30 分钟。2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。3. 细胞染色 (贴壁细胞) 3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

Emission (Em)：512

Excitation (Ex)：502

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参考文献：

[1]. Kamkaew A, et al. BODIPY dyes in photodynamic therapy. Chem Soc Rev. 2013 Jan 7;42(1):77-88.
[2]. Vasta JD, et al. Quantitative, Wide-Spectrum Kinase Profiling in Live Cells for Assessing the Effect of CellularATP on Target Engagement. Cell Chem Biol. 2018 Feb 15;25(2):206-214.e11.
[3]. Kang ZB, et al. Fluopack screening platform for unbiased cellular phenotype profiling. Sci Rep. 2020 Feb 7;10(1):2097.
[4]. Robers MB, et al. Quantitative, Real-Time Measurements of Intracellular Target Engagement Using Energy Transfer. Methods Mol Biol. 2019;1888:45-71.
[5]. Yuan H, et al. Fluorescent and radiolabeled triphenylphosphonium probes for imaging mitochondria. Chem Commun (Camb). 2013 Nov 14;49(88):10361-3.