概述
5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐是一种化学式为C8H6BrClNO4P.C7H9N的化合物，又名对甲苯胺蓝，简称BCIP。其是一种常用的生化试剂，常温下表现为白色至淡黄色结晶粉末，不溶于水。该物质主要作为碱性磷酸酶(ALP)的显色底物，常与硝基四氮唑蓝(NBT)配合使用进行酶联免疫检测 。
应用研究
分析检测领域
（1）在pH8.0的Tris- HCl缓冲溶液及32mg/L PEG20000的存在下，碱性磷酸酯酶(ALP)催化底物5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐(BCIP)水解生成不溶性的蓝色BCIP二聚体微粒，该微 粒在710nm波长处产生一个共振散射峰。在选定条件下，随着ALP活性增大，710nm波长处的共振散射峰强度线性增大，碱性磷酸酯酶浓度在 0.078～1.25U/L与共振散射强度增大值ΔI呈良好线性关系，其回归方程为：ΔI=512.6C+17.8，检出限为9.6×10-3U/L。该 法用于合成样品中碱性磷酸酯酶的测定，结果满意[1]。
（2）磁弹性传感器用于酸性磷酸酯酶活性测定。检测原理是以5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐(BCIP)为底物，经酸性磷酸酯酶水解后生成兰色二聚物沉淀，该二聚物沉淀能紧密的附着在传感器表面，导致传感器共振频率发生变化，传感器共振频率变化幅度正比于酸性磷酸酯酶浓度。分析过程中可以通过记录传感器共振频率变化幅度来对酸性磷酸酯酶进行定量分析，该法可用来检测1.5~15 U/l酸性磷酸酯酶，检测限可以达到1.5 U/l，与分光光度法相当[2]。
微生物培养与辨别技术领域
文献报道了一种念珠菌显色培养基的制备方法及其应用。具体地，利用特定浓度的氯化硝基四氮唑蓝，5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐，5-溴-6-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷三者组合作为念珠菌显色培养基中的主要显色组分。进一步利用念珠菌显色培养基培养不同种类的念珠菌一段时间后，能够根据不同种类的念珠菌显示出不同的颜色。其中，白色念珠菌能够显示出明显的红色，与其他种类的念珠菌的颜色均不同，红色菌落不仅显眼，相较于淡绿色或绿色菌落也更容易识别，能够很好地与其他菌落的颜色区分开来，便于鉴定人员直接通过肉眼观察并辨别出白色念珠菌[3]。
参考文献
[1]梁爱惠,刘高伞,蒋治良.5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐共振散射光谱法检测碱性磷酸酯酶[J].广西师范大学学报：自然科学版, 2012, 30(2):7.DOI:10.3969/j.issn.1001-6600.2012.02.018.
[2]吴仕辉.磁弹性无线生物传感器在生化分析中的应用研究[D].湖南大学,2006.DOI:10.7666/d.y892959.
[3]陈彩霞,李仲华,谭子欣,等.一种念珠菌显色培养基及其制备方法和应用:CN202411791101.5[P].