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内容来自用户:千年顽世
干细胞的培养条件
1.1.培养条件环境：细胞培养需要一个无菌的环境，所以尽量是在一个独立的房间里进行。要求配有空气净化系统，能够对整个房间进行杀菌的紫外灯。2.3.4.5.1.2.3.设备：二氧化碳培养箱、超净工作台、倒置显微镜、冰箱、水浴锅、离心机、实验桌、移液器等。实验耗材：一次性的细胞培养皿或细胞培养瓶、15ml或50ml离心管、脱脂棉花、封口膜等。试剂：干细胞对培养条件要求较高，可以根据自己的条件，尽量选用质量好的各种试剂。试剂的配制：DMEM培养基:去离子水中含1.34%DMEM粉末、0.22%NaHCO3MEF培养基：DMEM培养基中含10%FBS,1000u/ml青霉素,1000g/ml链霉素ES培养基:ES培养基：DMEM培养基中含15%FBS，1×106U青霉素，1×106g链霉素，1mM丙酮酸钠,0.1mM非必须氨基酸,2mM谷氨酰胺,0.1mM巯基乙醇,1000u/ml白血病抑制因子4.D-Hank's：0.8%NaCl,0.04%KCl,0.035%NaHCO3,0.006%KH2PO4,0.005325%Na2HPO4,0.001%酚红5.6.7.8.9.2.0.1%明胶:D-Hank’s溶液中含0.1%的明胶ES细胞冻存液：90%ES培养基，10%DMSOMEF细胞冻存液：90%MEF培养基，10%DMSOFeeder细胞冻存液：90%FBS，10%DMSO丝裂霉素C:根据产品说明书来配制培养步骤常见的干细胞培养是胚胎干细胞（EScells）培养。我们以小鼠的胚胎干细胞培养为例。1.小鼠胚胎成纤维细胞（mouseembryonicfibroblasts，MEF）的复苏胚胎干细胞一
