蛋白质纯化，凝胶过滤层析填料
我现在在做蛋白质纯化，蛋白没有标签，大小7KD，等电点8.8左右，要用凝胶过滤层析，想请问做过凝胶过滤层析的各位，用哪种填料比较好？现在已知常用的填料有交联葡聚糖凝胶，琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶和聚苯乙烯凝胶等。我已经知道要从蛋白大小来考虑柱子填料的规格了。谢谢了
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回答者：网友
首先琼脂糖凝胶可以排除，这是大孔凝胶，用于分子量较大的成分。 我做分子筛用的比较多的柱子都是葡聚糖凝胶凝胶，我的蛋白比你的大，用G50和G100的填料，做的结果都没什么问题。 你的蛋白7kD，如果没有什么特别的性质（高级结构是球形还是其他的，有无多聚），G50应该可以。如果你不放心，也可以考虑聚丙烯酰胺凝胶，它和葡聚糖凝胶相比更适合于分子量稍小的蛋白，可能更实用于你的实验。 聚苯乙烯凝胶没用过，不发表意见。
