自然杀伤（NK）细胞是一类特殊的淋巴细胞，具有重要的免疫调节和肿瘤清除功能。

  一、NK细胞的特点

  非特异性杀伤作用：NK细胞能够自发地识别并杀伤一些异常细胞，如肿瘤细胞和受病毒感染的细胞，而不需要事先致敏或抗原特异性激活。

  分泌细胞因子：活化的NK细胞能够分泌多种细胞因子，包括干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和趋化因子等，这些细胞因子能够调节其他免疫细胞的功能。

  识别机制：NK细胞通过多种途径识别靶细胞，包括缺乏表面MHC I类分子、应激相关分子（如ULPB）以及与靶细胞表面结合的抗体（抗体依赖性细胞毒性，ADCC）。

  临床应用前景：工程NK细胞作为一种潜在的癌症治疗手段正受到广泛关注。通过改造NK细胞，增强其杀伤能力和抗肿瘤效果，可以为癌症患者提供新的治疗选择。

  二、NK细胞形成和结构

 NK细胞是一类淋巴细胞，具有特殊的形成和结构特征。以下是关于NK细胞形成和结构的详细描述：

  1.形成过程：

  NK细胞起源于骨髓中的普通淋巴祖细胞（common lymphoid progenitors,CLPs），但也可以在脾脏、扁桃体和淋巴结等次级淋巴组织中形成。

  CD34+造血干细胞分化为淋巴引诱多潜能祖细胞（lymphoid-primed multipotent progenitors,LMPPs），然后转变为CLPs，这些细胞具有分化为多种类型先天性淋巴细胞的潜能。

  CD122的表达使CLPs进入NK细胞系，随后CD56标志着未成熟的NK细胞过渡到成熟状态。

  2.形态特征：

  在光学显微镜下，NK细胞的形态与大颗粒淋巴细胞相似，其核大、染色质粗、核仁突出。

  细胞质呈嗜碱性，带有嗜氮颗粒。

  3.结构特征：

  通过电子显微镜（EM）检查发现，NK细胞表现出各种形状和微绒毛。

  NK细胞的颗粒在结构和功能上类似于溶酶体，这些颗粒可能包含有助于NK细胞杀伤靶细胞的蛋白酶和其他杀伤性分子。

  三、不同来源的NK细胞分离培养方法

  1.外周血来源的NK细胞：

  分离方法：使用密度梯度离心法，如Ficoll-Paque离心法，将外周血样品分离出单个核细胞层。也可以使用免疫磁珠分选法，利用NK细胞特异性标记分选出NK细胞群。

  培养方法：将分离出的NK细胞培养在NK细胞培养基中，通常含有IL-2等细胞因子，以促进NK细胞的增殖和活性化。

  2.脐带血来源的NK细胞：

  分离方法：使用类似于外周血的分离方法，但需要更多的前处理步骤来提高NK细胞的纯度，因为脐带血中NK细胞浓度较低。

  培养方法：在培养基中添加适量的生长因子和细胞因子，如IL-2，以促进NK细胞的增殖和杀伤活性。

  3.组织来源的NK细胞（如淋巴组织、脾脏、骨髓等）：

  分离方法：使用机械分离或酶解法，将组织样品转化为单个核细胞，然后通过密度梯度离心等方法分离NK细胞。

  培养方法：根据不同来源的组织类型，优化培养条件，可能需要添加特定的生长因子和细胞激活剂，以促进NK细胞的增殖和活性化。

  4.诱导多能干细胞（iPSC）来源的NK细胞：

  分离方法：将iPSC诱导向NK细胞分化的过程中，可以利用特定标志物或基因表达来分选出产生的NK细胞。

  培养方法：将分离出的iPSC来源的NK细胞培养在适当的培养基中，添加所需的生长因子和细胞因子，以促进其成熟和功能的发展。