DL-组氨酸的合成

2026/5/2 8:00:11 作者:火华

简介

DL-组氨酸为白色结晶或结晶性粉末,无臭,味微苦,在水中略溶,在乙醇中微溶,在乙醚中几乎不溶,水溶液呈酸性或近中性,广泛应用于药品制剂、保健食品及生化研究等领域。

 DL-组氨酸的性状

DL-组氨酸的性状

合成

方法一:在37°C下进行含有5mg/l苏氨酸和50mg/l酪蛋白的M9培养基16小时。将培养基铺在含有5mg/l苏氨酸和50mg/l酪蛋白的M9琼脂平板上。在室温下孵育培养基,直至形成菌落。将菌落形成突变体应用于第二次筛选。在第二次筛选中,将突变体接种到800μl含有25μg/ml氯霉素和0.1 mM异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷的LB培养基中。将混合物在37°C下孵育16小时。在2800 x g的条件下收获生长的细胞10分钟。用100mM Tris-HCl(pH 8.5)洗涤生长的细胞两次。将生长的细胞重新悬浮到相同的缓冲液中。将部分(50μl)细胞悬浮液与50μl 30 mM l-Trp溶液混合。将细胞悬浮液在37°C下孵育16小时,然后加入100μl由10 mM Tris-HCl(pH 8.5)、1 U/ml d-氨基酸氧化酶、100 U/ml过氧化物酶、5 mM苯酚组成的比色测定混合物。向悬浮液中加入1 mM 4-氨基安替比林。经过培养分离得到标题化合物DL-组氨酸[1]。

方法二:将石墨粉末(Aldrich制造,粉末<100目,99.99%)5mg和金属铁粉(Wako Pure Chemical Industries,有限公司,海绵铁,99.9%)300mg放置在图1的二氧化硅舟上。也可以将两种粉末混合并直接放置在二氧化硅舟上,但如果两种粉末都撒在放置在同一二氧化硅舟上的二氧化硅棉上,则反应会得到更多促进。图1系统中的氮气以600 ml/分钟的速度流动并稳定,然后用电炉加热。炉温超过200°C,500~1000°C是理想的。达到相同温度后,加热水源和氨源,操作水龙头(1)~(7),使载气氮气输送水蒸气和氨气。通过与石墨反应产生的氨基酸和过量水蒸气被载气携带,变成氨基酸水溶液并被困在烧瓶C中。被困的氨基酸水溶液被冷冻干燥或通过离心机(DC-800,由Yamato Scientific Co.制造)干燥,固体成分再次溶解在0.02N HCl中,并通过高效液相色谱仪纯化得到标题化合物DL-组氨酸[2]。

参考文献

[1] Synthesis of DL-tryptophan by modified broad specificity amino acid racemase from Pseudomonas putida IFO 12996 By: Kino, Kuniki; et al. Applied Microbiology and Biotechnology (2007), 73(6), 1299-1305.

[2] Method for preparing amino acids from graphite as raw material Assignees: Japan Science and Technology Agency; National Institute of Materials Science Inventors: Nakazawa, Hiroki; et al. Japan.

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