MDA5 抗体 (YA2399)

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MDA5 Antibody (YA2399) 是一个兔来源、无偶联标记、抗 MDA5 的 IgG 单克隆抗体。

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10 μL	￥493	In-stock
50 μL	￥1281	In-stock
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WB: 蛋白质免疫印迹;
IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学;
IHC-F: 冰冻切片样本的免疫组织化学;
ICC/IF: 细胞免疫荧光;
IF-Tissue: 组织免疫荧光;
mIHC: 多重荧光免疫组化;
IP: 免疫沉淀;
ChIP: 染色质免疫沉淀;
FC: 流式细胞术;
ELISA: 酶联免疫吸附试验

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描述

MDA5 Antibody (YA2399) is a Rabbit-derived and non-conjugated IgG monoclonal antibody, targeting to MDA5.

宿主

Rabbit

克隆性

Recombinant, Monoclonal

分子量

Predicted band size: 117 kDa;

Observed band size: 117 kDa

请注意：因蛋白存在修饰或聚体等情况，以实测为准，预测仅为参考。

反应种属

Human

蛋白数据库

Q9BYX4

基因 ID

64135 [NCBI]

免疫原

A synthesized peptide derived from human MDA5 aa950-1025.

应用 & 推荐
稀释比例

应用	稀释比
WB WB: 蛋白质免疫印迹	1:500-1:1000
ICC/IF ICC/IF: 细胞免疫荧光	1:50-1:200

敏感性	Endogenous	纯度	Affinity Chromatography
偶联	Non-conjugated	修饰	Unmodified
同型	IgG

性状

液体

组分

Supplied in 50mM Tris-Glycine(pH 7.4), 0.15M NaCl, 40%Glycerol, 0.01% sodium azide and 0.05% BSA.

保存条件 & 期限

Stored at -20°C for 1 year. Avoid repeated freeze / thaw cycles.

运输条件

Shipping with blue ice.

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ALL WB ICC

Western blot analysis of extracts from THP-1(lane 2(20ug) ,Jurkat(lane 3(20ug) and HEK293(lane 4(20ug) using MDA5 Antibody (HY-P82654) Rabbit mAb. Proteins were transferred to a PVDF membrane and blocked with 5% non-fat milk in TBST for 2 hour at room temperature. The primary antibody (1/1000) and Loading control antibody (Beta Actin, HY-P80438, 1/10000) was used in 5% non-fat milk in TBST at 4°C overnight. Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG-HRP Secondary Antibody (1/10000) was used for 1 hour at room temperature.
Immunocytochemistry analysis of HepG2 cells labeling MDA5 with MDA5 Antibody (HY-P82654) at 1/50 dilution. Cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 15 minutes at room temperature, permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 10 minutes at room temperature, then blocked with QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining for 10 min at room temperature. Cells were then incubated with MDA5 Antibody (HY-P82654) at 1/50 dilution in QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining at 4 ℃. Alexa Fluor® 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG H&L（HY-P8002, Green) was used as the secondary antibody at 1/1,000 dilution. PBS instead of the primary antibody was used as the secondary antibody only control. The Nuclear counterstain was DAPI (Blue).
Immunocytochemistry analysis of HepG2 cells labeling MDA5 with MDA5 Antibody (HY-P82654) at 1/100 dilution. Cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 15 minutes at room temperature, permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 10 minutes at room temperature, then blocked with QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining for 10 min at room temperature. Cells were then incubated with MDA5 Antibody (HY-P82654) at 1/100 dilution in QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining at 4 ℃. Alexa Fluor® 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG H&L（HY-P8002, Green) was used as the secondary antibody at 1/1,000 dilution. PBS instead of the primary antibody was used as the secondary antibody only control. The Nuclear counterstain was DAPI (Blue).

背景

功能：先天免疫受体作为细胞质病毒核酸传感器，在感知病毒感染和激活一系列抗病毒反应 (包括诱导 I 型干扰素和促炎细胞因子) 中发挥重要作用 (PubMed:28594402, PubMed:32169843, PubMed:33727702)。其配体包括 5'端缺乏 2'-O-甲基化的 mRNA 和长双链 RNA (长度>1 kb)(PubMed:22160685)。配体结合后，该受体与线粒体抗病毒信号蛋白 (MAVS/IPS1) 结合，激活 IKK 相关激酶：TBK1 和 IKBKE，进而磷酸化干扰素调节因子：IRF3 和 IRF7，IRF3 和 IRF7 进而激活抗病毒免疫基因 (包括干扰素 (IFN)) 的转录。干扰素-α和干扰素-β。负责检测小核糖核酸病毒科成员，例如脑心肌炎病毒 (EMCV)、门戈脑心肌炎病毒 (ENMG) 和鼻病毒 (PubMed:28606988)。可检测冠状病毒 SARS-CoV-2 (PubMed:33440148, PubMed:33514628)。也可检测其他病毒，例如登革病毒 (DENV)、西尼罗河病毒 (WNV) 和呼肠孤病毒。还参与针对含有双链 DNA 基因组的病毒 (例如痘苗病毒) 的抗病毒信号传导。通过识别核糖核酸酶 L (RNase L) 在病毒感染过程中产生的 RNA 代谢物，在增强先天免疫信号传导中发挥重要作用。可能在增强自然杀伤细胞功能方面发挥重要作用，并可能参与多种肿瘤细胞系的生长抑制和凋亡。

亚细胞定位：细胞质；细胞核；线粒体

表达水平：
组织特异性：广泛表达，但表达水平较低。在胎盘、胰腺和脾脏中表达水平略高，而在脑、睾丸和肺中表达水平极低。

诱导：通过干扰素 (IFN) 和 TNF

异构体 & 翻译后修饰：Q9BYX4 有两种异构体：Q9BYX4-1：116689 Da (预测值)；Q9BYX4-2：25129 Da (预测值)。
SUMO 化修饰。SUMO 化修饰正向调控其在 I 型干扰素诱导中的作用，并受 PIAS2-β增强；被 RNF125 泛素化，导致其被蛋白酶体降解 (PubMed:17460044)。USP17/UPS17L2 依赖的去泛素化正向调控该受体 (PubMed:20368735)。通过 Lys-63 连接的泛素化被 TRIM25 泛素化，促进 IFIH1/MDA5 的激活 (PubMed:30193849)。 TRIM40 通过 Lys-48 连接的泛素化修饰对其进行泛素化，导致蛋白酶体降解 (PubMed:29117565)。TRIM65 通过 Lys-63 连接的泛素化修饰对其进行泛素化，促进 IFIH1/MDA5 的激活 (PubMed:28594402)；ISG15 对其进行 ISG 化修饰。登革病毒 (DENV) 或寨卡病毒 (ZIKV) 感染后，ISG 化水平升高。Lys-23 和 Lys-43 的 ISG 化修饰依赖于 Ser-88 的去磷酸化，并调节线粒体转位和寡聚化。对 IFIH1/MDA5 介导的细胞因子反应和病毒复制的限制至关重要；在 Ser-88 位点磷酸化 (PubMed:23499489, PubMed:33727702)。由磷酸酶 PPP11CA/PPP11CC 去磷酸化；去磷酸化先于 ISGylation，且是 ISGylation 所必需的 (PubMed:23499489, PubMed:33727702)；在细胞凋亡过程中，被加工成 3 种裂解产物。含有解旋酶的片段一旦从 CARD 结构域释放出来，就会从细胞质转位到细胞核。加工后的蛋白质显著增强细胞对 DNA 降解的敏感性；(微生物感染) 它可被柯萨奇病毒 B3、脊髓灰质炎病毒和肠道病毒 71 的蛋白酶 2A 切割并灭活，从而使病毒能够破坏宿主 I 型干扰素的产生。

亚基：在没有配体的情况下以单体形式存在，在双链 RNA 配体存在的情况下形成同源二聚体。可在长双链 RNA 上组装成螺旋或线性聚合物丝 (PubMed:33727702)。与 MAVS/IPS1 相互作用。通过 CARD 结构域与 TKFC 相互作用，病毒感染会抑制这种相互作用 (PubMed:17600090)。与 PCBP2 相互作用。与 NLRC5 相互作用。与 PIAS2-β相互作用。与 DDX60 相互作用。与 ANKRD17 相互作用。与 IKBKE 相互作用 (PubMed:17600090)。与 ATG5 和 ATG12 相互作用，既可以以 ATG5 和 ATG12 单体的形式存在，也可以以 ATG12-ATG5 缀合物的形式存在 (PubMed:17709747)。与 ZCCHC3 相互作用；导致 IFIH1/MDA5 激活 (PubMed:30193849)。与 RNF123 相互作用 (PubMed:27312109)。与 DDX3X 相互作用 (PubMed:20127681)。与 NOD1 相互作用；这种相互作用促进抗病毒基因的转录并抑制病毒复制 (PubMed:32169843)。与 ECSIT 相互作用；这种相互作用将 IFIH1 与线粒体上的 MAVS 复合物连接起来 (PubMed:25228397)。

RRID

AB_3104754

反应种属数据库

Entrez Gene: 64135 Human

SwissProt: Q9BYX4 Human

OMIM: 610155 Human

研究领域

Immunology

中文名

MDA5 抗体 (YA2399)

同用名

Helicard; Hlcd; IDDM19; IFIH1; MDA-5; RH116; RIG I like receptor 2; RLR 2; RNA helicase DEAD box protein 116

文件资料

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Data Sheet (443 KB) SDS (251 KB)

COA (194 KB)

抗体使用指南 (1083 KB)

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Help & FAQs

Do most proteins show cross-species activity?
Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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